多肽生產(chǎn)方法之合成法是在人們已獲知某種有特定活性的氨基酸組成的序列,利用其生產(chǎn)特定活性肽的方法。合成法制備多肽主要分為化學合成法、酶合成法和基因重組合成法 [8,9]。
(一)化學合成法
化學法合成多肽主要是通過固相或液相合成法制取所需的生物活性多肽。固相合成法常用于實驗室,用于蛋白質(zhì)、多肽等方面的研究,其特點是產(chǎn)品純度高,但成本高、產(chǎn)量低,直接合成的序列短、合成效率低,同時合成試劑的毒性較大,因此此法一般僅限于實驗室制備。固相合成法基本上只能用于氨基酸數(shù)目較少、分子量較小的多肽的合成,通過固相合成法獲得大分子的多肽仍具有較大難度。與固相合成法相比,液相合成法的優(yōu)點是產(chǎn)品純度高、產(chǎn)量大,適用于工業(yè)生產(chǎn),經(jīng)過不斷地改進和完善,可適用在生產(chǎn)價值高的短鏈或中鏈的保健型活性肽制品。
然而化學合成成本相對較高,難以實現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn),合成過程中難免會使用有機試劑,進而造成環(huán)境污染,副反應(yīng)較多,并且合成的目標多肽毒性較多,諸多因素限制了化學合成多肽的發(fā)展。
(二)酶合成法
酶合成法即用蛋白酶催化合成肽,多用于合成相對較短的肽。酶法合成反應(yīng)條件溫和,使用的藥劑毒性低,產(chǎn)物不會消旋,但是反應(yīng)的副產(chǎn)物較多,產(chǎn)率較低。
(三)基因重組法
基因重組法常用于合成肽鏈相對較長的肽,尤其是幾百個氨基酸組成的肽?;蛑亟M法可將調(diào)控多肽合成的基因序列重組到微生物等的遺傳物質(zhì)中,在受體生物中進行遺傳物質(zhì)的翻譯表達。該法的優(yōu)點是通過基因重組的方法可降低天然方法獲取的成本昂貴或產(chǎn)量低下的多肽的生產(chǎn)成本,并且安全性高,但基因重組制備多肽在前期研究技術(shù)難度大,還未應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)。