今天讓我們一起來了解一下多肽藥物的獲得方法吧
 

　　多肽藥物的獲得方法主要有3種來源，天然提取、生物、化學。
 

　　1.從天然產(chǎn)物中提取活性組分
 

　　一些天然產(chǎn)物中存在活性組分，可通過溶劑萃取法從簡單的混合物中提取出有效成分，若天然產(chǎn)物成分復(fù)雜、活性組分含量非常少，則需要利用酶解或微波輔助消解法，使蛋白質(zhì)前體降解，通過檢測設(shè)備對活性片段進行分離和檢測，快速有效地從混合物中發(fā)現(xiàn)具有活性的小肽。
 

　　2.生物合成(基因重組技術(shù))
 

　　基因重組技術(shù)是通過將多肽的基因序列構(gòu)建到載體上，形成重組DNA表達載體，并在原核或真核細胞中進行多肽分子表達、提取、純化。此方法適合制備大于50個氨基酸組成的目的多肽，且較易獲得。隨著基因工程生產(chǎn)多肽的技術(shù)趨于完善，加快了基因工程類多肽藥物的研制及臨床應(yīng)用的步伐。
 

　　3.化學合成(包括液相和固相兩種方法)
 

　　液相法是最先發(fā)展的多肽合成方法：其過程是將所需的氨基酸或者短肽配制成溶液，其中，一個氨基酸的氨基端和另外的氨基酸或短肽的羧基端以及不參與反應(yīng)的側(cè)鏈基團均被化學基團保護，而參加反應(yīng)的氨基酸或短肽的羧基則需進行活化，然后在溶液中發(fā)生偶聯(lián)。
 

　　反應(yīng)完成后，再用各種方法將沒有參加反應(yīng)的原料、活化劑等分離除去而得到純化多肽產(chǎn)物。多肽液相分段合成主要分為天然化學連接和施陶丁格連接。
 

　　天然化學連接是多肽分段合成的基礎(chǔ)方法，局限在于所合成的多肽必須含半光氨酸(Cys)殘基，因而限定了天然化學連接方法的應(yīng)用范圍，天然化學連接方法的延伸包括化學區(qū)域選擇連接、可除去輔助基連接、光敏感輔助基連接;
 

　　施陶丁格連接方法是另一種基礎(chǔ)的片段連接方法，其為多肽片段連接途徑開拓了更廣闊的思路，正交化學連接方法是施陶丁格連接方法的延伸，通過簡化膦硫酯輔助基來提高片段間的縮合率。
 

　　固相多肽合成法(SPPS，very important!)，是目前普遍采用的多肽合成方法：原理是將多肽序列C端的第一個氨基酸的羧基通過酯化反應(yīng)固定在不溶性的載體(樹脂+連接分子)上，然后以此氨基酸作為氨基組分，經(jīng)脫除氨基保護基團并同過量的活化后的羧基組分反應(yīng)形成肽鍵，之后重復(fù)脫保護、縮合、洗滌操作作過程以延長肽鏈長度，從而獲得所需長度的肽鏈。
 

　　最后，通過酸將肽鏈從樹脂上切割下來，并同時脫除所有保護基團，經(jīng)高效液相純化處理后，即可得到所需的多肽。
 

　　經(jīng)過多年的研究與發(fā)展，既克服了液相合成的費時和煩瑣，又降低了由操作帶來的損失，最大的優(yōu)點是合成中所有的純化步驟均以簡單的沖洗和過濾完成，大大減輕提純的難度，具有方便快捷、操作簡單和產(chǎn)率高的優(yōu)勢，其*性還表現(xiàn)為便于實現(xiàn)自動化，使其成為多肽化學合成的方法。