多肽合成儀的特點:
現(xiàn)如今的多肽合成儀,基本上都是用的固相合成的原理。多肽固相合成法的明顯特點是無須純化中間產(chǎn)物,合成環(huán)節(jié)能夠持續(xù)進行,才能為多肽合成的自動化打下基礎,是多肽合成化學的一項重點的突破。
多肽合成儀的合成過程:
在Fmoc化學合成的基礎上,先把所需合成的目標多肽的C-端氨基酸的羧基以共價鍵形式與一個不溶性的高分子樹脂相連,隨后以這個氨基酸的氨基當作多肽合成的起始點,同時它的氨基酸的羧基(已經(jīng)活化)作用生成肽鍵,持續(xù)重復這個流程,就可以獲得目標多肽。按照多肽的氨基酸組成不同,多肽后處理方法不同,純化方法也有差異。
多肽合成儀的常用載體:
鑒于多肽分子量比較小,免疫應答功效差,因此需要與載體偶連以提高免疫源性。常見的載體有KLH(銅藍蛋白),BSA,OVA等高分量的蛋白質(zhì),優(yōu)先選擇KLH。在LISA檢測多肽抗體效價時,部分多肽直接包板有難度,必須與BSA等偶連后再包板。